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                聲明:上海賽抑生物科技有限公司為本公司(大連美侖生物)在上海地區的銷售分公司
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                細胞增殖及毒性檢測試劑盒(CCK-8)增強型
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                產品問答
                CCK-8兩個波長都要測嗎? 需要怎樣計算?
                只測450nm下的OD值,細胞存活率 = [(As - Ab)/(Ac - Ab)] ×100% 抑制率 = [(Ac - As)/(Ac - Ab)] ×100% As:實驗孔(含有細胞的培養基、CCK-8、待測藥物)的吸光度 Ac:對照孔(含有細胞的培養基、CCK-8、沒有待測藥物)的吸光度 Ab:空白孔(不含細胞和待測藥物的培養基、CCK-8)的吸光度
                每次測定的數值不一樣,是什么原因?如何解決?
                可能會有以下幾個原因: 1)當在培養箱內培養時,培養板最外一圈的孔最容易干燥揮發,由于體積不準確而增加誤差。一般情況下,最外一圈的孔只加培養基,不作為測定孔用。 2)有可能會因為CCK-8沾在壁上而產生誤差,建議在加入CCK-8后,輕輕敲擊培養板以幫助混勻。 3)每孔的細胞數量過多或過少。請預先在1,000~100,000個/孔范圍內摸索條件。 4) 重復試驗請保證孵育時間、接種細胞數相同。
                CCK-8會導致細胞死亡嗎?
                CCK-8本身對細胞毒性特別小,作用時間長不會導致細胞都死亡,但是細胞長滿了,本身代謝會引起細胞死亡
                CCK-8除了用酶標儀還可以用什么儀器?紫外分光光度計行么?
                一般cck都是用酶標儀,紫外分光光度計最好不用,因為紫外我沒記錯一次只能測一個孔吧,而且還得把孔內液體吸出來到紫外用的皿里,而且檢測時間很長,CCK-8對孵育時間敏感,這樣誤差太大了
                OD值偏高?
                可以確認下培養時間,一般肉眼可見顏色變化即可檢測
                做CCK-8經常有氣泡,對吸光度有影響,有什么辦法去除么?
                有氣泡,沒辦法去除,但是可以避免有氣泡,加藥什么的槍頭抵著孔壁,慢點加液體,基本不會產生氣泡
                細胞能一邊培養一邊檢測?
                培養一段時間測CCK-8,然后換液后可以接著養。
                反映時間怎么確定?數值必須是1么?
                0.1-2.5都可以,最佳是1.0左右
                如何設定空白對照
                在不含細胞的培養基中加入CCK-8,培養一定的時間,測定450 nm的吸光度即為空白對照。在做加藥實驗(細胞毒性實驗)時,還應考慮藥物的吸收,可在不含細胞,加入藥物的培養基中加入CCK-8,培養一定的時間,測定450 nm的吸光度作為空白對照。
                鋪板細胞量有什么要求嗎?
                96孔板細胞建議鋪板5000-10000個/孔;不同細胞類型接種密度不一致,客戶可自行摸索,我們鋪96孔板,一般密度5*10的4次方,取100ul;可以您自己對細胞計數,保證每孔細胞數量一致?;蛘呖梢杂嫈?,方法:按不同細胞數鋪板,貼壁后加CCK-8,孵育1小時,然后檢測,OD值在1.5左右是最佳鋪板數
                哪些物質會影響CCK-8的測定?
                當有氧化還原性物質存在時會影響CCK-8的測定,因此當所加藥物為氧化還原性物質時需要換液再進行檢測。
                CCK-8對于不同的細胞,靈敏度是否一樣?
                不一樣,懸浮細胞與貼壁細胞相比較難顯色。對于貼壁細胞,一般加入CCK-8培養0.5-4小時吸光度已經很高,但對于懸浮細胞則可能吸光度較低,可以通過延長CCK-8的加入時間或增加細胞數量來解決。
                產品簡介
                產品參數
                質檢證書
                產品圖譜
                摩爾濃度計算器
                相關論文
                Cell Counting Kit-8(簡稱CCK-8),是一種基于WST-8而廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速、高靈敏度檢測的試劑盒。 

                CCK-8試劑中含有WST-8(化學名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽)是一種類似于MTT的化合物,它在電子耦合試劑1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)存在條件下,可以被線粒體內的脫氫酶還原為具有高度水溶性的橙黃色甲瓚產物Formazan (參考圖1),生成的Formazan數量與活細胞的數量成正比。因此可利用這一特性直接進行細胞增殖和毒性分析,細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。

                CCK-8與以往的增殖/毒性測定試劑相比,具有明顯優點(參考表1)。美侖CCK-8試劑盒具有靈敏度高、反應時間短、線性范圍寬、數據可靠、重現性好等特點,可以廣泛應用于藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗。


                1. 增殖/毒性測定試劑的比較

                檢測方法

                MTT法

                XTT法

                WST-1法

                CCK-8法

                甲瓚產物的水溶性

                差(需加有機溶劑溶解)

                檢測靈敏度

                很高

                很高

                最高

                檢測時間

                較長

                較短

                較短

                最短

                檢測波長

                560-600nm

                420-480nm

                420-480nm

                430-490nm

                細胞毒性

                高,細胞形態完全消失

                很低,細胞形態不變

                很低,細胞形態不變

                很低,細胞形態不變

                試劑穩定性

                一般

                較差

                一般

                很好

                批量樣品檢測

                可以

                非常適合

                非常適合

                非常適合

                便捷程度

                一般

                便捷

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                我司所售出產品僅供于科研研究用途(非臨床科研研究),每次銷售產品行為都適用于我司網上所列明的通用銷售條款。

                英文名字:Cell Counting Kit-8

                質量標準:Meilunbio

                MA0218-1 Meilunbio(1ML*1瓶)
                MA0218-2 Meilunbio(5ML*1瓶)
                MA0218-3 Meilunbio(10ML*10瓶)
                MA0218-5 Meilunbio(10ML*1瓶)
                MA0218-6 Meilunbio(5ML*10)

                請輸入貨號:
                請輸入批號:
                摩爾濃度計算器 (本計算器可幫助您計算出特定溶液中溶質的質量、溶液濃度和體積之間的關系)
                摩爾濃度計算公式:質量 (g) = 濃度 (mol/L) x 體積 (L) x 分子量 (g/mol)
                質量(g
                =
                濃度 (mol/L)
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                體積 (L)
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                分子量 (g/mol)
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